凋亡DNA Ladder提取试剂盒
描述：
凋亡(apoptosis)或程序化死亡的细胞，染色质DNA断裂形成长度约为n x 180bp (n=1,2,3,4…) 的DNA 片段，经琼脂糖凝胶电泳显示为阶梯状凋亡DNA Ladder，是凋亡细胞无可争辩的特征。本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder，原理涉及到快速裂解细胞，灭活核酸酶，酶学消化蛋白质和RNA，选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder。反应可在微量离心管进行，3小时完成，快速方便；无需有机抽提，检测灵敏度极高。
可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5-10 x 105个，但投入的细胞量可在1x 105 ~ 5x 106之间变化，其中应含有至少约1-2 x104个凋亡细胞。如果总细胞中有2 x104个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比，整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差，取材的量和部位难以掌握，这些因素会明显影响结果。但只要组织确实发生凋亡，有经验的用户可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder(参见说明4)。
补充说明：
目前，国内和国外大多数提取凋亡DNA的试剂盒仅仅是提提取细胞总DNA，包括基因组DNA和凋亡DNA。在随后进行DNA凝胶电泳检测何照相时，高丰度的基因组DNA呈现很强的荧光背景，通称会掩盖微弱的凋亡DNA Ladder荧光。这种试剂盒成本较低价格便宜，但灵敏度也很低。如果凋亡细胞数量不足或者凋亡程度不足，这类试剂盒通称无法给出清晰的凋亡DNA Ladder从而导致实验失败，浪费宝贵的实验材料及大量人力物力，实属得不偿失。
为避免上述问题，我们的调亡DNA Ladder提取试剂盒(wC1102)选择性地提取凋亡DNA，去除基因组DNA，很少量的凋亡DNA也可以在凝胶中清晰地显现出来, 因而具有很高的灵敏度。其灵敏度实际上只受限于溴化乙啶-DNA染色灵敏度。只要确实有少量细胞发生凋亡即可检测到凋亡DNA ladder。 |
拿烈火点烟onb
发表于 2015-10-26 18:48:29
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